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摘要：近年來，豬偽狂犬病病毒在國內(nèi)豬場(chǎng)的陽性感染率居高不下，嚴(yán)重威脅養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。而由于養(yǎng)殖戶病急亂投醫(yī)，疫苗選擇隨意，疫苗特性與程序不對(duì)稱，首免日齡不正確，免疫效果往往事與愿違。經(jīng)過多年的免疫實(shí)踐，筆者認(rèn)為，搞好豬偽狂犬病的免疫防控，必須抓住病毒易感的關(guān)鍵時(shí)間節(jié)點(diǎn)，避開母源抗體干擾，選用高效安全疫苗，并科學(xué)掌握免疫的時(shí)機(jī)和方法，才能達(dá)到比較理想的效果。

關(guān)鍵詞：豬偽狂犬病；免疫方法；

1  常用的疫苗種類
豬偽狂犬病毒屬于甲型皰疹雙鏈DNA病毒，雖然只有一個(gè)血清型，但毒力有強(qiáng)弱之分，毒株的致病性也有高有低。近年來，我國科研團(tuán)隊(duì)已經(jīng)分離到多個(gè)不同的毒株，證明豬偽狂犬病毒毒株已經(jīng)發(fā)生變異，且不同毒株感染同一動(dòng)物時(shí)，病毒可以重組，產(chǎn)生更強(qiáng)毒力的毒株，引起新的疫情暴發(fā)。因此，對(duì)合理選擇疫苗預(yù)防控制該病提出了較高的要求。目前，用于預(yù)防控制與凈化豬偽狂犬病的疫苗很多，現(xiàn)簡要分述于下。
1．1  滅活疫苗
滅活疫苗的制備，主要通過將PR病毒接種到雞胚或敏感細(xì)胞進(jìn)行增殖，當(dāng)病毒滴度達(dá)到要求或細(xì)胞出現(xiàn)典型的病變后收獲病毒，然后經(jīng)過滅活加入佐劑而制成。滅活疫苗安全性較高，不易引起散毒與潛伏感染，在世界各地區(qū)都有應(yīng)用。但滅活疫苗也存在一定的缺點(diǎn)，因其不能將內(nèi)源性抗原提呈給免疫系統(tǒng)，難以誘導(dǎo)細(xì)胞毒T細(xì)胞產(chǎn)生反應(yīng)(CTL)，所以很少或不能引起細(xì)胞免疫，只會(huì)產(chǎn)生體液免疫；同時(shí)，接種滅活疫苗后產(chǎn)生的抗體滴度隨著時(shí)間的推移會(huì)逐漸下降，因此，需要重復(fù)接種，且免疫劑量較大，成本費(fèi)用較高，有時(shí)還會(huì)發(fā)生過敏反應(yīng)。
1．2  常規(guī)自然缺失弱毒活疫苗
常規(guī)意義上的弱毒活疫苗，是將分離到的野毒株經(jīng)非豬源細(xì)胞反復(fù)傳代，加入突變劑培養(yǎng)而獲得的疫苗。國際上主流毒株都是Bartha和Buk株。目前，國內(nèi)豬場(chǎng)使用較多的常規(guī)基因缺失疫苗有Bartha株、SA215株、HB-98株和BUK株等。其中，廣泛使用的是gI／gE雙基因缺失PR弱毒凍干活疫苗（Bartha-k61。也叫k61)。
由于其雙基因缺失，能夠阻斷弱毒株的回復(fù)毒力，并可以與野毒相區(qū)別，一般而言，自然基因缺失弱毒活疫苗具有良好的免疫原性，且安全性高，價(jià)格又低廉，一直在防控中發(fā)揮著重要作用。但自然缺失弱毒苗的缺點(diǎn)是主要的毒力基因TK基因沒有缺失，毒力未經(jīng)充分致弱，有可能返強(qiáng)而致該病重新流行，同時(shí)還存在造成潛伏感染或向未免疫生豬散毒的可能性。
1．3  基因工程疫苗
近年來，對(duì)豬偽狂犬病病毒的基因組結(jié)構(gòu)、基因缺失對(duì)病毒生物學(xué)性質(zhì)和免疫原性影響的研究有了突破性進(jìn)展，一系列豬偽狂犬病基因工程疫苗被開發(fā)出來。目前主要包括：基因工程缺失弱毒活疫苗、核酸疫苗、亞單位疫苗、重組病毒疫苗等。
1．3．1  基因工程缺失弱毒活疫苗
上世紀(jì)80年代初，基因工程缺失疫苗研發(fā)成功。第一代基因缺失疫苗是指缺失PRV一個(gè)主要的毒力基因（如TK）獲得的疫苗，該疫苗具有較高的安全性，30～35日齡仔豬接種后能產(chǎn)生中和抗體，并在遭受攻毒后可表現(xiàn)再次免疫應(yīng)答，給豬群提供有效的保護(hù)。如四川農(nóng)業(yè)大學(xué)郭萬柱教授團(tuán)隊(duì)研制成功的豬偽狂犬病SA215（TK基因缺失）活疫苗，就是我國第一株動(dòng)物病毒基因工程疫苗。
由于TK基因?qū)儆诿傅鞍谆?，不能用血清學(xué)方法區(qū)別免疫接種豬與自然感染豬，要將此區(qū)別開來必須缺失相應(yīng)的糖蛋白基因，鑒于此，研究人員在TK基因缺失的基礎(chǔ)上又缺失了相應(yīng)的糖蛋白基因而構(gòu)建了含TK基因缺失的雙缺失和多缺失疫苗株，進(jìn)而研制成功第二代基因缺失疫苗。試驗(yàn)表明，其顯著特點(diǎn)是可以通過血清學(xué)方法將免疫接種豬與自然感染野毒的豬相區(qū)別，有利于精準(zhǔn)防控，為偽狂犬病的根除提供有力支撐。
據(jù)報(bào)道，世界上第一個(gè)注冊(cè)使用的PRV基因工程疫苗OM-NIVAC-PRV就是TK基因缺失疫苗。此后，PRV Ea TK－/gG－、TK－/gE－疫苗株、PRV閩A TK－／gC－、TK－／gE－等毒株相繼研發(fā)。其中應(yīng)用較多的有TK－／gC－、TK－／gD－、TK－／gE－、TK－／gC－等雙缺失疫苗株和TK－／gE－／gG－三缺失疫苗株。
基因工程缺失弱毒活疫苗的優(yōu)點(diǎn)是，缺失了目的基因的幾百甚至幾千個(gè)堿基，缺失區(qū)域明確，所以返祖的可能性極小。測(cè)定結(jié)果表明，這些疫苗株均具有較好的安全性、良好的遺傳穩(wěn)定性和很強(qiáng)的免疫原性，免疫動(dòng)物都能獲得較強(qiáng)的保護(hù)力。但該疫苗對(duì)儲(chǔ)存和運(yùn)輸條件要求非常嚴(yán)苛，現(xiàn)實(shí)情況下一般豬場(chǎng)難以保證，進(jìn)而可能影響到實(shí)際的免疫效果。
1．3．2  核酸疫苗
核酸疫苗又稱為DNA疫苗或基因疫苗，是指將一種或多種抗原編碼外源蛋白質(zhì)的核酸表達(dá)載體注射入動(dòng)物機(jī)體，以激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)外源蛋白質(zhì)特異性的免疫應(yīng)答。其主要優(yōu)點(diǎn)是能夠同時(shí)激活細(xì)胞免疫和體液免疫，避免潛伏感染，不受母源抗體干擾，安全性高，免疫期長；缺點(diǎn)是雖然可以產(chǎn)生較高的抗體水平，但對(duì)強(qiáng)毒攻擊的保護(hù)力不太理想。
1．3．3  亞單位疫苗
亞單位疫苗是通過基因工程技術(shù)，將PRV的保護(hù)性抗原基因進(jìn)行克隆并在原核或真核系統(tǒng)中高效表達(dá)所獲得的產(chǎn)物制成的疫苗。因其具有抗原遞呈與免疫增強(qiáng)的雙重作用，不含核酸遺傳物質(zhì)，接種后不會(huì)產(chǎn)生持續(xù)感染或潛伏感染，產(chǎn)生的免疫應(yīng)答可與野毒感染相區(qū)分，有利于疫病的控制和消滅。但由于生產(chǎn)成本較高，免疫原性不及弱毒疫苗及滅活疫苗，因此應(yīng)用受到限制，目前僅限于一些特殊情況下使用。
1．3．4  重組活載體疫苗
由于偽狂犬病的病毒宿主范圍和基因組都比較大，可在不影響PRV毒株增殖的同時(shí)插入一個(gè)或多個(gè)外源基因而重組獲得活載體疫苗。目前，主要有以腺病毒為載體的重組疫苗、以豬痘病毒為載體的重組疫苗及直接以豬偽狂犬病毒為載體的重組疫苗等。
重組疫苗優(yōu)點(diǎn)是載體病毒較穩(wěn)定，免疫原性持久，能夠誘發(fā)體液免疫和細(xì)胞免疫，避免弱毒活疫苗和滅活疫苗免疫的缺陷，接種方便安全，免疫譜相對(duì)較廣。比如，接種以豬偽狂犬病毒為載體的重組雙價(jià)疫苗，能使豬同時(shí)獲得對(duì)PRV和CSFV兩種強(qiáng)毒攻擊的保護(hù)，因此，重組活載體疫苗不僅對(duì)偽狂犬病有很好的防控效果，而且對(duì)其它病毒類病的免疫防控也有良好的應(yīng)用前景。

2  疫苗的動(dòng)態(tài)選擇
選擇疫苗通常由毒株、效價(jià)、佐劑三方面進(jìn)行評(píng)估，從而確定其安全性與有效性。研究表明，常規(guī)滅活疫苗、常規(guī)弱毒活疫苗以及基因缺失疫苗都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)，在生產(chǎn)中可根據(jù)具體情況動(dòng)態(tài)選用。當(dāng)然，選擇疫苗時(shí)，能夠通過疫苗免疫血清與流行毒株的交叉中和實(shí)驗(yàn)，依據(jù)中和效價(jià)的高低來選擇更為科學(xué)合理。
2．1  重視毒株的匹配
近年來，在實(shí)施豬偽狂犬病預(yù)防控制與凈化根除中，使用基因缺失疫苗已成為主流趨勢(shì)，現(xiàn)有疫苗Bartha株、HB-98株、 SA215株和BUK株仍然發(fā)揮著主導(dǎo)作用，其中大部分國產(chǎn)和進(jìn)口疫苗采用的均是Bartha毒株(代表產(chǎn)品是Bartha-K61株)。由于用其免疫能與自然感染野毒相區(qū)分，免疫原性好，免疫后能產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的免疫力，對(duì)預(yù)防豬偽狂犬病經(jīng)典株和變異株均有效，且安全性高、無毒力返強(qiáng)等風(fēng)險(xiǎn)，目前不少國家都在推廣應(yīng)用，免疫效果也比較理想。
一般情況下，對(duì)于正在暴發(fā)流行的豬場(chǎng)或野毒陽性豬場(chǎng)或免疫效果不好、抗體水平顯著下降的豬場(chǎng)，應(yīng)選用與其流行毒株相一致的弱毒活疫苗，對(duì)全豬群進(jìn)行緊急預(yù)防接種，以期迅速而全面建立免疫保護(hù)控制傳播；在疫情穩(wěn)定后，則以使用滅活苗為主，以期獲得穩(wěn)定而較持久的抗體水平，并減少因使用弱毒活疫苗帶來散毒的可能性。比如，對(duì)于偽狂犬野毒陰性豬場(chǎng)的常規(guī)免疫，建議使用基因缺失滅活苗。
2．2  充分考慮疫苗的效價(jià)和佐劑
效價(jià)即抗原含量。我們知道，免疫主要是通過特異性的抗原來產(chǎn)生特異性的免疫力來預(yù)防特定疾病的，因此疫苗每頭份中抗原含量的多少，決定著疫苗的效價(jià)水平。目前，豬偽狂犬病疫苗的抗原含量單位用CCID50或TCID50（即半數(shù)細(xì)胞感染量）來表示，由于廠家不同，所生產(chǎn)疫苗的抗原含量有所差異，選購疫苗時(shí)不能僅看價(jià)格高低，而要參看抗原含量的高低，選擇抗原含量高的產(chǎn)品。
疫苗的佐劑通常分為增強(qiáng)型和普通型，油佐劑一般屬增強(qiáng)型佐劑，水佐劑則包括普通型和增強(qiáng)型兩種。這些佐劑性能特點(diǎn)各異，不能籠統(tǒng)的分出優(yōu)劣。
一般來說，油佐劑疫苗抗體產(chǎn)生較慢，但能獲得穩(wěn)定而較持久的抗體水平，缺點(diǎn)是應(yīng)激相對(duì)較大；水性佐劑疫苗，抗體產(chǎn)生快，高峰期高，應(yīng)激較小，但抗體維持時(shí)間較短，容易出現(xiàn)波動(dòng)。因此，選擇水佐劑或油佐劑疫苗，主要看免疫的對(duì)象和目的。如果給經(jīng)產(chǎn)母豬接種，想利用疫苗快速產(chǎn)生高峰的特點(diǎn)，保證母豬在產(chǎn)仔時(shí)獲得較高的母源抗體專門保護(hù)新產(chǎn)仔豬，通常選用水佐劑疫苗較好；如果想通過母源抗體既保護(hù)仔豬又保護(hù)母豬本身，則應(yīng)選用油佐劑疫苗，這樣有利于保證母豬長時(shí)間處于較高而平穩(wěn)的抗體水平。
近年來，隨著基因缺失疫苗的研發(fā)，水包油佐劑的偽狂犬病疫苗已經(jīng)上市，這類疫苗既能降低油佐劑疫苗應(yīng)激大的缺陷，又能維持油佐劑抗體持久、均勻度好的優(yōu)勢(shì)；同時(shí)，高效價(jià)配以合適佐劑，可以產(chǎn)生更高水平的免疫力，有效阻斷病毒循環(huán)傳播，有利于偽狂犬病的控制與凈化，各類豬群均可選用。

3  正確掌握免疫時(shí)機(jī)與免疫方法
防控實(shí)踐表明，豬偽狂犬病疫苗的首免時(shí)機(jī)選擇很重要，免疫次數(shù)也并非越多越好。只有抓住偽狂犬病毒易感的關(guān)鍵時(shí)間節(jié)點(diǎn)，掌握正確的免疫程序和操作方法，確保防控不留死角，才能達(dá)到理想的防控效果。
3．1  首免時(shí)機(jī)的選擇
豬偽狂犬病疫苗的首免時(shí)間主要是由母源抗體決定的，同時(shí)，還要考慮豬場(chǎng)既往感染壓力與使用疫苗質(zhì)量的高低。當(dāng)前，偽狂犬疫苗因廠家不同抗原效價(jià)參差不齊，免疫程序也應(yīng)相應(yīng)調(diào)整，不能憑經(jīng)驗(yàn)一套程序“打天下”。一般而言，疫苗效價(jià)越高，產(chǎn)生的免疫力越強(qiáng)，仔豬獲得的母源抗體也就越高，相應(yīng)的首免時(shí)間就要推遲些。近年來，由于防控壓力較大，首免時(shí)間提前成為各豬場(chǎng)普遍存在的問題，導(dǎo)致母源抗體和疫苗抗體相互作用，相互抵消，結(jié)果往往事與愿違。
根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，在豬場(chǎng)管理水平較高，周圍環(huán)境壓力較小的情況下，如果母源抗體水平較高，首免日齡就要盡量往后推。不過，由于使用疫苗的差異，產(chǎn)生的母源抗體持續(xù)時(shí)間不一，在確定首免時(shí)間時(shí)，最好先對(duì)仔豬進(jìn)行抗體檢測(cè)，然后再根據(jù)抗體衰減規(guī)律，制定個(gè)性化免疫程序。
跟蹤測(cè)定顯示，一般母豬使用高效價(jià)基因缺失疫苗免疫后，新生仔豬獲得的母源抗體都比較高，一般在10-12周左右仍有保護(hù)力，所以仔豬的最佳首免時(shí)間就應(yīng)安排在10-12周齡；如果用的是低效價(jià)疫苗，母源抗體水平低只能維持3-4周齡，仔豬就應(yīng)在3-4周齡實(shí)施首免。鑒于近年來高效價(jià)基因缺失疫苗普遍推廣使用的實(shí)際，建議正常豬場(chǎng)，于70日齡左右進(jìn)行小豬首免，首免后間隔3-4周加強(qiáng)免疫一次；而既往感染壓力較大的豬場(chǎng)，還應(yīng)提前對(duì)新產(chǎn)仔豬進(jìn)行滴鼻免疫。
3．2  滴鼻免疫的操作
調(diào)查發(fā)現(xiàn)，母源抗體、野毒感染等的干擾，是造成免疫失敗的主要因素，如果豬場(chǎng)感染壓力持續(xù)加大，臨產(chǎn)母豬抗體水平低下，則應(yīng)提前實(shí)施仔豬免疫接種，特別是周邊省份及本地有豬偽狂犬病流行時(shí)，為迅速有效抑制病毒感染，同時(shí)免受母源抗體干擾，提早對(duì)新生仔豬實(shí)施滴鼻免疫不失為一種十分有效的補(bǔ)充免疫手段。
滴鼻免疫屬于粘膜免疫范疇，母源抗體干擾較小，能夠快速釋放抗原，因此成為近年豬偽狂犬病防控中的熱門話題。建議在仔豬1-3日齡進(jìn)行，疫苗應(yīng)選用基因缺失弱毒活疫苗，佐劑以生理鹽水為好。根據(jù)免疫經(jīng)驗(yàn)，滴鼻操作時(shí)若使用一般針管，不僅劑量很難把握，而且容易被豬噴出，為避免疫苗浪費(fèi)，提高免疫效果，滴鼻免疫最好使用專用滴鼻器（以霧化液體形式分散，可增加吸收面積），劑量每頭仔豬1ml，每個(gè)鼻孔各0.5ml。要求滴鼻后仔豬鼻孔保持朝上姿勢(shì)一定時(shí)間，以利于疫苗的充分吸收。對(duì)于感染壓力較大的陽性豬場(chǎng)，一般1-3 日齡首免滴鼻后，隔4周加強(qiáng)免疫1次，到10周齡再肌注1次滅活疫苗。
3．3  合理制定程序?qū)嵤┟庖?br /> 相關(guān)調(diào)查表明，由于有些豬場(chǎng)只重視母豬與種豬的免疫，而忽視育肥豬的免疫，導(dǎo)致育肥前期容易出現(xiàn)免疫空白；加之，疫苗選擇隨意，疫苗特性與程序不對(duì)稱，首免日齡不正確，免疫劑量不足等因素，使育肥期豬群不足以抵御強(qiáng)毒攻擊而感染；此時(shí)臨床出現(xiàn)咳嗽癥狀，更無法阻擋病毒的循環(huán)傳播，導(dǎo)致母源抗體消失后的豬群感染，gE轉(zhuǎn)陽并排毒，使整個(gè)豬場(chǎng)的感染壓力驟然上升。
根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，檢測(cè)豬場(chǎng)有無阻斷病毒循環(huán)，可在母源抗體消失殆盡（即16周齡以上）后檢測(cè)gE抗體。如果gE是陽性，提示一定是感染了野毒，如果是陰性，則表示沒有野毒存在，因此，通過檢測(cè)育肥豬野毒感染情況，結(jié)合母源抗體檢測(cè)，再制定個(gè)性化免疫程序，對(duì)防控偽狂犬病有著重要的意義。對(duì)于經(jīng)常使用基因缺失疫苗的豬場(chǎng)，一般免疫程序?yàn)椋荷L育肥豬70天首免，30天后加強(qiáng)免疫1次；后備母豬配種前30天免疫1次，間隔30天加強(qiáng)免疫1次；經(jīng)產(chǎn)母豬每4個(gè)月免疫1次，產(chǎn)前1個(gè)月左右再加強(qiáng)免疫1次；新留種公豬間隔30-40天免疫2次，以后每4個(gè)月免疫1次。
豬偽狂犬病防控始終是一個(gè)動(dòng)態(tài)的過程，究竟使用哪種疫苗？執(zhí)行何種免疫程序？應(yīng)用哪種免疫方法，都應(yīng)依據(jù)母源抗體檢測(cè)與血清學(xué)監(jiān)測(cè)情況，并結(jié)合發(fā)病臨床癥狀與本場(chǎng)、本地區(qū)流行狀況而定。